猪的胚胎移植

猪的胚胎移植是进行猪胚胎工程，如体外受精、胚胎切割、性别决定、胚胎克隆、基因导入、嵌合体的制作、配子和胚胎冷冻保存等项生物技术的关键技术之一。

1.供体猪和受体猪的选择进行胚胎移植的猪无论是供体还是受体都应具备以下基本条件：

(1)供体或受体猪都应具备在下能经受手术的体质，无全身性疾病，生殖系统未受感染。

(2)供体猪应满足胚胎移植目标所要求的遗传学条件。

(3)受体猪应是适合妊娠、分娩和哺乳的母猪。

2．超数排卵和胚胎收集

(1)超数排卵猪是多胎动物，一次发情可排卵10-15个。若用激素处理则排卵数还可再增加。给供、受体母猪同时肌肉注射一针PMSG(1000-1500IU)，72h后注射500IU的hCG，供体在hCG注射后24h和48h两次配种输精，2―5天可以手术采卵。受体做发情记录但不输精。

(2)胚胎收集胚胎的采集一般采用手术方法。胚胎的发育阶段不同，收集的部位也不一样，4细胞期以前的胚胎可从输卵管采集，4细胞期以后的胚胎应从子宫内采集。

手术采卵法程序如下：

①手术淮备术前24h停止喂食，仅给予饮水。

②全身按体重注射盐酸氯受酮、846并配合使用进行。

③固定和术部消毒用皂水和毛刷洗刷腹部和大腿内侧部，将切口部周围剃毛，水洗后用毛巾揩干。广泛涂上手术用聚乙烯吡咯酮碘液，加少量水，用毛刷刷洗。用灭菌纱布揩干，再涂上手术用聚乙烯毗咯酮碘液，用酒精棉揩净。

④开腹从最后乳头和耻骨前端的中间，在距肚脐3―5厘米的正中线切开皮肤8―10厘米，沿着切口左右分开皮下脂肪，使腹膜露出后，用钝头剪刀剪开腹膜。

⑤冲卵用插进切口的手将子宫角引向切口，从切口处暴露子宫角、输卵管和卵巢，抓住所见卵巢。将导管插入到子宫角，另一头与玻璃插管连接，插入接收冲卵液的试管。装有钝针的注射器插入到输卵管并注入冲洗液，使冲洗液经输卵管向子宫角流去，冲洗结束后要认真观察并记录卵巢情况(黄体数、残留卵泡数、残留卵泡的大小以及排卵情况)。

⑥缝合。把卵巢、子宫角纳入腹腔，向腹腔注入防粘连剂和抗生素。为防止腹部疝气产生，缝合时对腹膜要尤加注意。作结节或连续缝合。腹膜缝合后撒布磺胺粉，缝合脂肪层，最后结节或褥状缝合皮肤。缝合后在术部涂上稀碘酊。

胚胎收集后，在显微镜下进行质量评定，选择形态正常，发育阶段与时间相符的胚胎进行移植。

3．胚胎移植手术移植与手术采卵一样，先进行、仰卧保定等，然后切开正中线，使子宫角等露出。把位于离子宫―输卵管接合部约5厘米处的子宫角下方的子宫系膜用拇指和食指牢牢固定，避开子宫角背面能看到的血管，用钝针垂直于表面刺入到子宫角内腔，制成小孔。再将预先吸有胚胎的巴斯德吸管从小孔垂直插入子宫角腔内，移植的部位是在子宫角顶端附近，将约有0．1―0．2mml保存液一起把胚胎注入子宫腔，一般每头猪可移植15―20枚胚胎。

4．供体和受体术后观察供体在下次发情时(或全过一个情期)即可照常配种，或经过2―3个月重复作供体。受体如果发情，说明胚胎移植失败；如未发情，再继续观察，在适当时期进行妊娠检查，如确已妊娠，则应加强饲养管理。